Что такое биологическая проба и ее особенности
Переливание крови или гемотрансфузия является лечебным средством, спасшим миллионы жизней. Но результат переливания бывает не только положительным, но и отрицательным.
Невозможно дать 100% гарантии, что у пациентов, которым переливали кровь доноров, не возникнут отрицательные реакции и осложнения. Чтобы этого не случилось, у донора и реципиента берутся пробы на индивидуальную совместимость крови.
Биологическая проба при переливании крови проводится в начале процедуры трансфузии. Она защищает пациента от осложнений, причиной которых становятся второстепенные групповые системы эритроцитов. Они представлены большим количеством антигенов.
Пробы на индивидуальную совместимость
Пробы на индивидуальную совместимость проводятся по двум системам: по системе АВ0, а также по резус-фактору донора и рецепиента.
По системе АВ0
Центрифуга, которая используется для определения групп крови
При проведении пробы на индивидуальную совместимость по системе AB0 (также известной как холодовая проба) :
- Берут 3-5 мл свежей крови реципиента, центрифугируют ее
- забирают каплю получившейся сыворотки.
- Затем капля наносится на белую тарелку рядом с небольшой каплей крови донора, капли смешиваются
- Спустя 5-10 секунд оценивается, изменился раствор или нет.
- Если «слипания» красных клеток крови не произошло, то можно переходить к проведению пробы на установление индивидуальной совместимости по резус-фактору.
По резус-фактору
Известно два общепринятых способа определить совместимость по резус-фактору.
Первый подразумевает использование центрифуги. Для этого в пробирку для центрифугирования помещают 2 капли сыворотки пациента, 1 каплю крови из флакона, 1 каплю 33% декстрана и центрифугируют 5 минут. После этого к смеси добавляют 3-4 мл физраствора и оценивают результаты. При отсутствии агглютинации можно перейти к пробе на биологическую совместимость.
Второй метод (так называемая тепловая проба) заключается в следующем. В колбочку помещается 1 капля крови донора, 2 капли теплого 10% раствора желатина и пара капель сыворотки реципиента. Смесь инкубируют в течение 10 минут на водяной бане, где поддерживается температура +46-+48 градусов, а затем также вносят 5 мл физиологического изотонического раствора. Оценка результатов проводится аналогично пробе с центрифугой.
Виды групповой принадлежности, которые проверяются во время пробы
При поступлении пациента, которому необходимо провести переливание биожидкости, проводят первичное исследование по R-фактору и группе крови. Процедура осуществляется в клиниках, диагностических лабораториях.
Компоненты крови, которые применяются для переливания:
- эритроциты;
- тромбоциты;
- лейкоцитная масса;
- плазма.
Все компоненты должны соответствовать группе системы АВО и резус-фактору, которые имеются у реципиента.
По системе АВ0
Группа крови АВ0 является основной системой классификации крови, используемой во всем мире. Это основа для сравнения крови между донорами и пациентами, Принадлежность человека в группе крови АВ0 определяется через генетическое наследование. Некоторые люди наследуют гены, известные, как гены A. Они кодируют антигены, которые провоцируют отторжение клеток крови.
У этих людей присутствует кровь группы А. Другие наследуют гены B, которые кодируют антиген B и имеют группу крови B. Также возможно унаследовать одну копию каждого антигена от родителей, что приводит к появлению крови АБ. Некоторые люди не получают в наследство ни гены A, ни B. У них в организме содержится кровь группы 0.
Техника проведения пробы по системе АВ0:
- берется пластинка, на одну сторону которой заносят данные пациента, а на другую наносят 2 капли его сыворотки крови;
- в неё добавляется капля крови донора (соотношение 10:1);
- кровь перемешивается путем периодического покачивания пластинки, за реакцией наблюдает лаборант;
- в случае отсутствия склеивания эритроцитов донора лаборант делает вывод, что кровь совместима по группам АВ0;
- если появляется склеивание (агглютинация), это указывает на их несовместимость.
По резус-фактору
Система группировки крови осложняется наличием или отсутствием резус-фактора, еще одного важного компонента в крови. Наличие R-фактора или его отсутствие указывает на то, что, кто-то имеет «отрицательную» или «положительную» кровь. Вместо того чтобы делить людей по группе крови на A, B, AB или 0, врачи определяют, являются ли они носителями A-, A +, B-, B +, AB-, AB +, 0- или 0 +.
Специфичность любого организма определяется набором белков или антигенов, которые являются частью любой ткани. В крови эритроциты являются поверхностными антигенными комплексами.
Одним из них является фактор Rh или антиген Rh. В зависимости от этого все люди делятся на носителей антигена R+ и антигена R-. В отношении донорской совместимости речь идет только об эритроцитарной массе и отмытых эритроцитах.
В классическом варианте полностью совместимым считается только кровь с одним и тем же R- фактором и группой. Но это правило работает на практике не всегда. В некоторых ситуациях, когда нужно срочное переливание, времени на определение совместимости нет. Единственным спасением остается переливание цельной крови или эритроцитов в соответствии с принципом гипотетической совместимости.
Ее варианты приведены в таблице:
донор пациент | I группа, 0(I) | II группа, А (II) | III группа, В (III) | IV группа, АВ (IV) |
I группа 0 (I) | совместимо | несовместимо | несовместимо | несовместимо |
II группа А (II) | совместимо | совместимо | несовместимо | несовместимо |
III группа Б (III) | совместимо | несовместимо | совместимо | несовместимо |
IV группа АВ (IV) | совместимо | совместимо | совместимо | совместимо |
По таблице можно сделать выводы:
- Люди с первой группой крови являются универсальными донорами, но они могут быть реципиентами только крови первой группы.
- Люди с четвертой группой крови являются универсальными реципиентами, хотя они могут быть донорами только для людей с четвертой группой.
Совместимость RH-фактора в крови определяется только двумя вариантами, независимо от членства в группе: людям с RH-отрицательной кровью можно переливать только RH-отрицательную кровь. Люди с RH-положительной кровью могут стать реципиентами крови как RH-положительными, так и RH-отрицательными донорами.
Проба на совместимость по группам крови системы АВО (на плоскости)
Порядок проведения исследования:
Пробу производят на планшете со смачиваемой поверхностью.
1. Планшет маркируют, для чего указывают Ф.И.О. и группу крови реципиента, Ф.И.О. и группу крови донора и номер контейнера с кровью.
2. Из пробирки с исследуемой кровью реципиента берут осторожно пипеткой сыворотку и наносят на планшет 1 большую каплю (100 мкл).
3. Из сегмента трубки пластикового мешка с трансфузионной средой, которая приготовлена для трансфузии именно этому больному, берут маленькую каплю (10 мкл) донорских эритроцитов и наносят рядом с сывороткой реципиента (соотношение сыворотки и эритроцитов 10:1).
4. Капли перемешивают стеклянной палочкой.
Оценка годности крови к переливанию
Кровь донорская перед началом переливания проверяется тем же врачом, который будет проводить процедуру трансфузии и пробные действия.
Он должен провести осмотр продукта, отметив при этом:
- срок годности крови;
- наличие и правильность паспортизации вводимого продукта.
- внешний вид и состояние биологической жидкости.
Визуально кровь, предназначенная для вливания, разделена на 3 слоя:
- верхний слой – прозрачная жёлтая плазма;
- средний слой – полоса лейкоцитов и тромбоцитов сероватого цвета;
- нижний – эритроциты красного цвета.
Трёхслойность характерна для цельной крови, предназначенной для переливания, и хорошо просматривается в стеклянных флаконах.
Если для трансфузии предназначены эритроцитные компоненты крови, то они могут быть в виде суспензии, криоконсервированные. Другим, часто используемым компонентов, является плазма. Она представлена в жидком виде и сухом, лиофилизированном.
Показания и противопоказания к переливанию
Есть много причин, по которым может потребоваться переливание крови.
Вот лишь некоторые из них:
- Сложная операция или травма, при которых произошла большая потеря крови.
- Кровотечение в желудочно-кишечном тракте из-за язвы или другого заболевания.
- При лейкемии или заболевании почек, которые вызвали анемию (дефицит здоровых эритроцитов).
- После лучевой или химиотерапии.
- Заболевание крови или серьезные проблемы с печенью.
Показания к переливанию эритроцитной массы:
- Острый серповидно-клеточный криз (для профилактики инсульта).
- Большая кровопотеря> 30% от объема крови.
- Гемоглобин <7 г на дл.
- Симптоматическая анемия.
Показания к переливанию продуктов плазмы:
- Профилактика активного кровотечения у пациента на антикоагулянтной терапии перед процедурой.
- Активное кровотечение.
- Внутричерепное кровоизлияние
- Острая диссеминированная внутрисосудистая коагулопатия.
- Микрососудистое кровотечение во время массивной инфузии.
Переливание тромбоцитов может быть показано для предотвращения кровоизлияния у пациентов с тромбоцитопенией.
Абсолютным противопоказанием к переливанию крови будет острая сердечная недостаточность, которая сопровождается отёком лёгкого и инфаркт миокарда. Если человек получил травматический шок, потеряв при этом большую массу крови, то в этом случае кровь переливать необходимо в срочном порядке, несмотря на симптомы заболеваний.
К относительным противопоказаниям относятся:
- функциональные нарушения печени, почек;
- последствия повреждения стенок сосудов при тромболии и тромбозах;
- гипертония III стадии;
- сложные расстройства мозгового кровообращения;
- перекрестная аллергия;
- бронхиальная астма;
- сердечный порок, миокардит, септический эндокардит;
- милиарный, остротекущий туберкулёз;
- геморрагический васкулит.
Совместимость крови донора и реципиента
Во время переливания кровь должна быть точно подобрана. Если человеку из группы крови А дают кровь от донора из группы крови В, анти-В-антитела будут прилипать к антигенам В на донорских эритроцитах, попадающих в их организм. Это вызывает реакцию, которая может быть фатальной. Следовательно, точное соответствие имеет решающее значение.
Перекрестное совпадение — это процедура, выполняемая перед переливанием крови, чтобы определить, является ли донорская кровь совместимой или несовместимой с кровью реципиента.
Совместимость определяется путем сопоставления различных систем групп крови, наиболее важными из которых являются системы ABO и Rh, или путем прямого тестирования на наличие антител на образцах донорских тканей или крови. При перекрестном сопоставлении выявляются несовместимости между донором и реципиентом, которые не будут видны при типировании крови.
Основное перекрестное сопоставление включает в себя тестирование сыворотки пациента с донорскими клетками, чтобы определить, есть ли у пациента антитело, которое может вызвать гемолитическую реакцию трансфузии или снижение выживаемости донорских клеток.
Процедура проведения биологической пробы и переливания
Биологическая проба при переливании крови проводится в начале гемотрансфузии. Несмотря на проверку по группам АВ0 и R-фактора, врачи не всегда могут быть уверенными в полной совместимости крови донора и пациента. Для исключения осложнений проводится ещё одна проба в начале переливания – биологическая.
Действия врача перед взятием пробы
Перед гемотрансфузией врач проводит следующие действия:
- Указывает наличие показаний к переливанию одного из компонентов крови в карте пациента.
- Заручается добровольным согласием реципиента или его представителя о проведении терапевтической процедуры.
- Проверяет все данные на этикетке контейнера с донорской кровью, которая после окончания процедуры вкладывается в медицинскую карту.
- Записывает результаты проверки крови пациента по системе АВ0 и резус-фактору.
- Проверяет эритроциты или полную кровь, находящиеся в контейнере, по R-фактору и системе АВ0, и фиксирует в медицинской карте результаты проверки.
- Фиксирует как положительные, так и отрицательные результаты биологической пробы, проведенной трижды в процессе переливания крови.
Где и как берется проба?
Переливания крови, а также иммуногематологические анализы проводятся в стационаре, специализированных клиниках или амбулаториях. Для этого необходимо оборудованное помещение с естественным освещением, температурой не менее 16–25°С, а также приборы, инструменты, расходные материалы для проведения анализов и терапевтической операции.
Биологическая проба при переливании крови в процессе гемотрансфузии проводится в условиях стационара лечащим или дежурным врачом. В клиниках осуществляется стационарно или амбулаторно по назначению хирурга, терапевта или гематолога.
Алгоритм проведения переливания
Контейнер с биологической массой до начала процедуры находится в холодильнике. Перед использованием его вынимают и выдерживают при комнатной температуре 30–35 мин. К моменту переливания она должна достигнуть +37°С.
Перед началом трансфузии обязательно делается биологическая проба, врач при этом осуществляет определенную последовательность действий:
- Вводится капельно 10 мл гемотрансфузионной жидкости. Скорость введения от 40 до 60 капель в мин.
- Производит закрытие зажима на системе внутривенного вливания.
- В течение 3 мин. наблюдает за состоянием пациента.
Во время наблюдения проверяется:
- пульс;
- АД;
- дыхание;
- температура тела;
- изменение цвета кожи, если оно есть;
- общее состояние.
Вся последовательность действий проводится ещё 2 раза. В промежутках между биологическими пробами введение крови не осуществляется.
После введения биологической пробной крови у некоторых пациентов появляются тревожные сигналы: озноб, тошнота, рвота, чувство жара, стеснение в груди. При обнаружении хотя бы одного признака требуется немедленное прекращение всей процедуры трансфузии.
После остановки терапевтической операции у пациента производят забор крови и направляют её в лабораторию, где производится индивидуальный подбор массы эритроцитов.
Биологическая проба при переливании крови проводится независимо от количества вводимой крови, скорости её введения. Процедуру проводят также и в случае экстренной трансфузии. Если пациенту вводится несколько доз крови, то биологическая проба должна проводиться перед каждой новой дозой.
Переливание крови — это обычная медицинская процедура, при которой донорская кровь предоставляется через узкую трубку, помещенную в вену на руке. Люди получают переливания крови по многим причинам — хирургическое вмешательство, травмы, болезни и нарушения свертываемости крови.
Кровь имеет несколько компонентов, в том числе:
- Красные клетки несут кислород и помогают удалить отходы.
- Белые клетки помогают организму бороться с инфекциями.
- Плазма — это жидкая часть крови.
- Тромбоциты помогают образованию сгустка крови и прекращению кровотечения.
Переливание обеспечивает ту часть крови, которая необходима, при этом чаще всего переливают эритроциты. Нередко вводится и цельная кровь, содержащая все части, но переливания цельной крови мало распространены.
Для введения эритроцитной массы в лечебной практике применяются и другие пути: внутриаортальный, внутрикостный, внутриартериальный. Донорский контейнер с небольшим остатком биологической жидкости должен сохраняться в течение 48 ч после проведения процедуры.
Правила переливания
Следующим шагом является взятие общего анализа крови с последующим разделением его на два исследования, первое из которых проведут в лаборатории, а второе — в специальных донорских отделениях на определение группы, резус-фактора, уровня гемоглобина и наличия инфекций. Полученные результаты обязательно сравнивают друг с другом и при подтвержденном сходстве без наличия заразных заболеваний, пациента приглашают в кабинет для взятия забора. После всех исследований кровь донора собирается в специальный контейнер и проходит степень очистки в центрифуге, где плазма отделяется от эритроцитов. Далее помещается в плазмоэкстрактор, который отделяет плазму от клеток. Все эти меры по очистке обязательны, так как цельная, не очищенная от своего содержимого, кровь для переливания уже давно не используется во врачебной практике во избежание передачи инфекционных заболеваний.
Для взятия берется около 300-400 мл.
Подробный видеоматериал про переливание
Что можно и нельзя после переливания?
Пациент, получивший дозу крови в условиях стационара, должен в течение 2 ч. соблюдать постельный режим. Наблюдает за ним в это время лечащий врач. Реципиенту ежечасно измеряют АД, температуру тела.
Проводится контроль наличия мочи в виде почасового объёма и фиксируется изменение её цвета. Красноватый цвет при наличии прозрачности говорит о деструкции эритроцитов и развитии гемолиза. На следующий день пациент сдаёт общий анализ мочи и крови.
В случае проведения гемотрансфузии в условиях клиники, пациент после окончания процедуры должен находиться под врачебным наблюдением не менее 3 ч. При наличии устойчивого АД и пульса, нормальной функции мочевыделения, отсутствии побочных реакций пациент отпускается из клиники.
После переливания крови большинство людей чувствуют себя прекрасно и испытывают слабые побочные эффекты. В редких случаях пациенты плохо реагируют на перелитую кровь в процессе проведения процедуры. В таких случаях процесс прерывают и оказывают человеку медицинскую помощь. Тщательный осмотр перед переливанием — лучший способ избежать плохой реакции.
Состояние пациента после переливания
В подавляющем большинстве случаев люди могут возобновить нормальную деятельность после переливания крови, включая нормальное питание, питье и прием всех существующих лекарств.
Большинство людей может вернуться домой вскоре после переливания, если только основное заболевание не требует пребывания в больнице. Пациенты должны быть осведомлены о признаках побочной реакции и немедленно обратиться к врачу, если это необходимо.
Важно, чтобы медицинский работник, выполняющий переливание, проводил скрининг перед процедурой и тщательно следил за пациентом во время процесса. Реакции более вероятны в начале переливания, хотя они могут иногда происходить позже. Острые реакции могут быть опасными для жизни, если их не лечить немедленно.
Острые гемолитические реакции происходят, когда пациенту вводятся несовместимые эритроциты. Это чаще связано с ошибками при получении или маркировки образцов группы и образцов антител или невозможностью провести необходимые проверки у постели больного до введения крови.
Признаки и симптомы несовместимости эритроцитов:
- Боль в месте канюляции.
- Боль в груди, спине или животе.
- Гипотония / гипертония.
- Тахикардия.
- Лихорадочное состояние.
- Кровотечение
- Коллапс.
- Гемоглобинурия.
При инфузии тромбоцитов возможны осложнения в случае введения загрязненного вещества.
Общие признаки включают в себя:
- лихорадочное состояние;
- тахикардию;
- коллапс;
- острое повреждение лёгких, вызванное трансфузией.
Осложнения при переливании плазмы, содержащей антитела белых клеток, возникают в течение 6 ч после переливания и включают в себя:
- непродуктивный кашель;
- гипотонию;
- острую одышку;
- гипоксию.
Аллергические реакции обычно происходят в начале переливания, и симптомы включают в себя:
- гипотонию;
- бронхоспазм;
- боль в груди, животе;
- одышку;
- тошноту, рвоту;
- крапивницу;
- покраснение кожи;
- конъюнктивит.
Могут возникнуть серьезные аллергические реакции, анафилактический шок, при котором пациент не может нормально дышать, при этом могут начаться проблемы с сердцем. Реакция после переливания является ответом иммунной системы на донорскую кровь. Она может произойти сразу или намного позже, и может быть легкой или тяжелой. Задержка реакции после процедуры может длиться в течение 3-10 дней.
Следует обратиться за медицинской помощью, если появились следующие признаки:
- двоение в глазах, головная боль;
- головокружение, ощущение приближающегося обморока;
- тошнота, диарея или спазмы в животе;
- фиолетовые пятна на теле в виде точек;
- головокружение и слабость примерно через 7 дней после процедуры;
- потная и прохладная кожа;
- посинение губ;
- пожелтение кожи и глазных белков.
Лекарственные препараты помогут улучшить состояние:
- Антигистаминные средства уменьшат зуд и отек при легкой аллергической реакции.
- Для предотвращения воспалительного процесса можно принимать стероиды.
- Лекарства для снижения температуры помогут улучшить состояние.
- Диуретики помогут избавиться от лишней жидкости.
Принимаемые препараты следует заранее согласовать с врачом, проводившим процедуру переливания крови.
Гемотрансфузия помогает восстановить объем крови, активировать протромбин, увеличить кровоток, помочь организму противостоять аноксемии, а также улучшить защитные функции и устойчивость к болезням. Для того чтобы процедура переливания крови прошла без осложнений и не вызвала дальнейших реакций, врачи проводят серьёзную проверку в виде проб на резус-фактор, АВ0 и биологических проб.
Проба на биологическую совместимость
Перед процедурой переливания крови необходимо провести биологическую пробу
Проба на биологическую совместимость, по сути — это первый этап непосредственно гемотрансфузии и проводится исключительно врачом. Врач, проводящий пробу, выполняет следующие действия:
- подсоединяет капельную систему и вводит первые 15-20 мл донорской крови струйно;
- останавливает трансфузию;
- ждет 3-5 минут, наблюдая за пациентом. Насторожить должны появление тахикардии, затруднения дыхания, болей в пояснице, озноба или жара.
- если все протекает благополучно, пробу считают положительной и выполняют дальнейшую трансфузию
Таким образом, если все пробы на совместимость прошли благополучно, можно проводить переливание крови. Правильная скорость переливания составляет 50-70 капель в минуту.
Конечно, существуют не только группы, описанные в системах AB0 и резус-фактора, так как всего на сегодняшний день описано 250 групп крови. Однако, проведение описанных выше проб на совместимость позволяет выявить несовместимость и по большинству других агглютининов и агглютиногенов, что в итоге делает гемотрансфузиологические мероприятия относительно безопасной процедурой при правильной подготовке.